La 2.ª edición de la Madrid Challenge by La Vuelta se celebró entre el 11 de septiembre de 2016 como preámbulo a la última etapa de la Vuelta a España 2016 con 15 giros a un circuito urbano de 5,8 km en la ciudad de Madrid con una distancia total recorrida de 87 km.
La carrera hizo parte del UCI WorldTour Femenino 2016 como competencia de categoría 1.WWT del calendario ciclístico de máximo nivel mundial siendo la última carrera de dicho circuito y fue ganada por la ciclista belga Jolien D'Hoore del equipo Wiggle High5. El podio lo completaron la ciclista australianaChloe Hosking del equipo Wiggle High5 y la ciclista italianaMarta Bastianelli del equipo Alé Cipollini.
Equipos
Tomaron parte en la carrera un total de 19 equipos invitados por la organización de los cuales 18 correspondieron a equipos de categoría UCI Team Femenino y la selección nacional de España.
La Madrid Challenge by La Vuelta otorga puntos para el UCI WorldTour Femenino 2016, incluyendo a todas las corredoras de los equipos en las categorías UCI Team Femenino.[2] Las siguientes tablas muestran el baremo de puntuación y las 10 corredoras que obtuvieron más puntos: